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Masson染色操作注意事项
点击次数:443 发布时间:2016-11-12
Masson染色是结缔组织染色中zui经典的一种方法,是显示组织中纤维的主要方法之一,是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关,分子的大小由分子量来体现,小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织;而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。然而,淡绿或苯胺蓝的分子量都很大,因此Masson染色后肌纤维呈红色,胶原纤维呈绿色或蓝色,主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
 
Masson染色时胶原纤维呈蓝色(被苯胺蓝所染)或绿色(被亮绿所染),肌纤维呈红色(被酸性品红和丽春红所染),这与阴离子染料分子的大小和组织的渗透性有关。如已固定的组织用一系列阴离子水溶性染料先后或混合染色,则可发现红细胞被zui小分子的阴离子染料着染,肌纤维与胞质被中等大小的阴离子染料着染,而胶原纤维则被大分子的阴离子染料着染。
 
Masson染色操作注意事项
1、切片脱蜡应尽量干净。
2、组织固定起着非常重要的作用,使用不同的固定液可延或缩短染色时间。
3、经典Masson染色中,常要求使用试剂(A)染核,也可用Harris苏木精染核,但Harris苏木精染核后切片颜色不够鲜艳,因为染色目的主要在于区分胶原纤维和肌纤维,一般也可以省略该染色步骤。
4、试剂(B)的分化时间应该依据切片厚薄、组织的类别和新旧而定。
5、试剂(E)为0.2%乙酸水溶液,可使色彩更清晰鲜艳,如果使用量大可自行配制。
6、用试剂(F)分化要在镜下控制,分化到胶原纤维呈淡红色;纤维呈红色即可。分化时间根据染色深浅而定,一般1~2min。
7、返蓝液常使用氨水水溶液,亦可自行配制Scoot促蓝液或0.1~1%碳酸锂水溶液。
8、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
9、使用场所应通风,并远离火源。
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